微生物限度檢查儀在實(shí)驗(yàn)前后的一系列操作
將供試品注入微生物限度培養(yǎng)器內(nèi),通過(guò)檢驗(yàn)儀自帶內(nèi)置進(jìn)口隔膜液泵負(fù)壓抽濾,將供試品中微生物截留在濾膜上,用取膜器取出濾膜,微生物限度檢查儀轉(zhuǎn)移至配置好的固體培養(yǎng)基上,菌面朝上,平貼。蓋上蓋子形成封閉的培養(yǎng)盒,置于相應(yīng)的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)并計(jì)數(shù)。
微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000 級(jí)下的局部潔凈度100 級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,防止再污染。單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。
1.實(shí)驗(yàn)前
1.1實(shí)驗(yàn)用工器具的準(zhǔn)備:檢測(cè)過(guò)程中用到的玻璃平皿需滅菌(濕熱滅菌121℃、30分鐘或干熱滅菌160℃、2小時(shí))備用;剪刀、鑷子等需先用紗布包好,外包牛皮紙包好扎緊,滅菌(濕熱滅菌121℃、30分鐘);移液管、槍頭等用報(bào)紙包好扎緊,滅菌(濕熱滅菌121℃、30分鐘)。
1.2培養(yǎng)基及稀釋液的準(zhǔn)備:根據(jù)檢驗(yàn)樣品,計(jì)算出培養(yǎng)基與稀釋液的用量,按照比例進(jìn)行配置,包好,根據(jù)培養(yǎng)基與稀釋液的屬性,進(jìn)行濕熱滅菌,備用。
1.3潔凈服準(zhǔn)備:將當(dāng)天所用潔凈服放入滅菌鍋中進(jìn)行滅菌,備用;或使用已滅菌且在有效期內(nèi)的潔凈服。
1.4確保實(shí)驗(yàn)潔凈區(qū)域通風(fēng),觀(guān)察潔凈室各個(gè)規(guī)定區(qū)域的壓差是否符合規(guī)定,若不符合,及時(shí)通知設(shè)備部門(mén),進(jìn)行調(diào)整。
2.實(shí)驗(yàn)中
2.1將實(shí)驗(yàn)所需的平皿、培養(yǎng)基、工器具、稀釋液放入傳遞窗中微生物限度檢查儀,打開(kāi)紫外燈,照射30分鐘。
2.2進(jìn)入潔凈區(qū)域,手清潔消毒,換上潔凈服,進(jìn)入檢查室,打開(kāi)潔凈工作臺(tái)通風(fēng),用消毒劑擦拭臺(tái)面,取出傳遞窗中照射后物品,按照使用先后順序置于潔凈工作臺(tái)上,擺好后紫外照射30分鐘,人員退出檢查室,紫外照射結(jié)束后,繼續(xù)通風(fēng)30分鐘,檢測(cè)人員方可進(jìn)入檢查室進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
2.3實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需點(diǎn)酒精燈,拆開(kāi)滅菌后包好的培養(yǎng)基外層,在近火焰處輕微灼燒培養(yǎng)基瓶口,打開(kāi)瓶蓋,傾倒培養(yǎng)基至滅菌后的平板中,待冷凝后使用。
3.實(shí)驗(yàn)后
3.1清潔及衛(wèi)生:做完實(shí)驗(yàn)后,用消毒劑對(duì)操作臺(tái)面進(jìn)行擦拭消毒,待實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)物和實(shí)驗(yàn)廢棄物傳出潔凈區(qū)域后,使用純化水對(duì)地面進(jìn)行清潔。
3.2培養(yǎng)及結(jié)果觀(guān)察:需氧菌平板應(yīng)在30-35℃下,培養(yǎng)3-5天,霉菌與酵母菌平板應(yīng)在20-25℃下,培養(yǎng)5-7天,空白與陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。